Uso de Microscopia de Alta Resolução para Investigar o Papel Funcional do Exosome em Complexos Sub-nucleolares

Resumo

A síntese de ribossomos é um processo que demanda muita energia e que é iniciado com a transcrição dos RNAs ribossomais precursores (pré-rRNAs) no nucléolo em células eucarióticas. RNA polimerase I transcreve o pré-rRNA que contém as sequências dos rRNAs maduros 18S, 5.8S e 25/28S, enquanto que RNA polimerase III transcreve o pré-rRNA 5S. Estes pré-rRNAs passam por várias reações de processamento que incluem modificações de nucleotídeos e clivagens endo- e exonucleolíticas, para então dar origem aos rRNAs maduros. Estes, junto com aproximadamente 80 proteínas ribossomais, vão formar as subunidades ribossomais 40S (menor) e 60S (maior). Uma da exonucleases que participam do processamento de pré-rRNA é o exossomo, um complexo formado por até 14 subunidades em levedura, que é responsável pelo processamento inicial do pré-rRNA 7S para formar o rRNA maduro 5.8S e pela degradação do espaçador 5'-ETS depois da sua liberação do transcrito primário de rRNA.Em um trabalho recente de colaboração entre nossos grupos de pesquisa, a localização do exossomo de levedura foi estudada, durante o qual foi observado que o exossomo, apesar de nucleolar, estava excluído da região sub-nucleolar enriquecida em RNA polimerase I. Estes resultados preliminares são novos e muito interessantes e para entender o papel funcional do exossomo nesses sub-compartimentos nucleolares, estamos propondo continuar estes estudos, o que poderá ajudar no entendimento da regulação do processamento de pré-rRNA e do controle de qualidade ribossomal, assim como da separação de complexos no nucléolo. Este projeto também proporcionará o fortalecimento da colaboração entre nossos grupos. (AU)