Avaliação da senescência e autofagia dos osteócitos durante o envelhecimento em ratos e ratas de meia idade tratados com resveratrol

Resumo

Estudos indicam que há um aumento da senescência e redução da autofagia nos osteócitos durante o envelhecimento, e que essas mudanças estão envolvidas na perda óssea associada ao envelhecimento. Tem sido reportado que o resveratrol poderia reduzir a perda óssea, embora os mecanismos celulares e moleculares ainda sejam pouco compreendidos. Além disso, os efeitos desses agentes sobre a autofagia e senescência dos osteócitos durante o envelhecimento ainda não foram investigados. Assim, neste estudo pretende-se avaliar os efeitos do resveratrol no tecido ósseo, na senescência e autofagia dos osteócitos, em ratos machos e fêmeas de meia idade.. Ratos Wistar machos e fêmeas com idades de 3 meses (jovens) e 12 meses (meia-idade) serão utilizados neste estudo. As ratas de meia-idade serão ovariectomizadas (OVX) ou Sham-operadas (Sham) e após 30 dias os animais serão divididos nos seguintes grupos (G) de 6 animais cada: Ratos machos (GI) e fêmeas (GII) jovens controles; Ratos machos de meia-idade tratados com solução veículo (GIII) ou com 80 mg/kg de resveratrol (GIV); Ratas Sham de meia-idade tratadas com solução veículo (GV); Ratas de meia-idade OVX tratadas com solução veículo (GVI), com 10 µg/kg de 17²-Estradiol (GVII) (Vakili et al. 2021), ou com 80 mg/kg de resveratrol (GVIII). Os ratos machos e fêmeas jovens servirão como grupo controle jovem para aquisição de dados basais. Após 12 semanas de tratamentos, os ratos serão eutanasiados e os ossos longos serão coletados e processados para análises histológicas e ultraestruturais. Cortes de tecido ósseo serão submetidos a reações imuno-histoquímica/imunofluorescência, microscopia imunoeletrônica ou de hibridização in situ, para detecção dos marcadores de autofagia e senescência nos osteócitos. Amostras também serão processadas para análises da expressão gênica (qPCR) e proteica (western blot) desses marcadores. Análises transcriptômicas por bioinformática também serão realizadas. Os dados serão submetidos a análises estatísticas (pd0,05). (AU)