Efeito do fator de necrose tumoral (TNF) sobre a ativação e expressão de receptores TNFR1 e TNFR2 por subpopulações de linfócitos Th17 e Treg de mulheres saudáveis

Resumo

A pré-eclâmpsia (PE) é uma síndrome específica da gravidez caracterizada por níveis plasmáticos elevados de citocinas pró-inflamatórias, como o fator de necrose tumoral (TNF) que desempenham papel importante na fisiopatologia da doença. A ligação de TNF com os receptores TNFR1 e TNFR2 na superfície celular ativa diferentes vias de sinalização. O TNFR1 induz morte celular por apoptose ou necrose e é também importante para o desenvolvimento de células T efetoras, enquanto o TNFR2 é predominantemente expresso por células T reguladoras CD4+/FoxP3+ e a co-expressão de CD25 com TNFR2 identifica células com maior capacidade supressora. Embora o desbalanço da relação Treg/Th17 já esteja bem descrito na PE, o entendimento da ação do TNF na modulação dos receptores TNFR1 e TNFR2 e das subpopulações de linfócitos T poderá trazer novos conhecimentos para a compreensão da resposta inflamatória sistêmica e o desbalanço das subpopulações de células T nessa patologia. Objetivo: Este estudo tem como objetivo avaliar a ação de TNF recombinante solúvel na ativação de subpopulações de linfócitos T CD4+ (Th17 e Treg) de mulheres saudáveis não-grávidas pela indução de receptores de TNF na membrana dessas células. Sujeitos e Métodos: O sangue periférico de 16 mulheres saudáveis, não grávidas será obtido e as células mononucleares (PBMCs) serão cultivadas in vitro na presença ou ausência de TNF por 4h e 18h, sendo a expressão de TNFR1 e TNFR2 determinada na membrana das células por citometria de fluxo. A concentração dos receptores solúveis de TNF (sTNFR1 e sTNFR2) será determinada no sobrenadante da cultura dessas células por ensaio imunoenzimático (ELISA). Os resultados serão analisados por testes paramétricos ou não paramétricos com nível de significância de 5%.