Modulação de expressão de UCH-L1 como uma proposta terapêutica para doenças neurodegenerativas

Resumo

Doenças neurodegenerativas afetam milhões de pessoas no mundo e ainda não existem terapias que reduzam a progressão da doença e causem poucos efeitos colaterais. A UCH-L1 é uma enzima deubiquitinase, fundamental para a manutenção dos níveis de ubiquitina livre, regulação da degradação de proteínas específicas e do balanço redox celular. É muito expressa em neurônios, sendo que em doenças neurodegenerativas sua expressão foi encontrada reduzida. Modelos murinos knock-out para essa enzima ou com mutações de perda de função apresentam fenótipos semelhantes ao dessas doenças, como déficits motores e estresse oxidativo, porém, a expressão ectópica de UCH-L1 nos modelos restabeleceu a saúde e integridade da citoarquitetura neuronal. Assim, uma possível abordagem terapêutica para essas enfermidades é promover o aumento da expressão de UCH-L1 endógena em neurônios. O promotor do gene Uchl1 possui um sítio repressor de expressão em células neuronais responsivo a um fator de transcrição fundamental para neuroinflamação, condição simultânea e associada a doenças neurodegenerativas. Portanto, esse projeto visa desenvolver uma terapia de edição gênica, baseada na modulação de expressão de UCH-L1, utilizando de alvo o sítio repressor do gene Uchl1, para apoiar o tratamento de doenças neurodegenerativas. Especificamente, o trabalho irá realizar mutagênese do promotor associado ao ensaio de gene repórter da luciferase; padronização da estratégia de edição gênica em células neuronais; e validação da estratégia em modelos in vitro e in vivo de doença de Parkinson e doença de Alzheimer, avaliando aspectos de eficácia de edição gênica e especificidade, bem como os fenótipos relacionados à doença antes e após a aplicação da terapia. Sendo assim, esse estudo deverá abrir caminhos para uma nova abordagem terapêutica para doenças neurodegenerativas através da modulação da expressão de UCH-L1. (AU)