Expressão Gênica e Proteica de Marcadores da Via Glicolítica em Colangiocarcinoma

Resumo

Introdução - O colangiocarcinoma (CCA) é uma neoplasia maligna biliopancreática, classificado de acordo com a localização em intra-hepático (iCCA) e extra-hepático(eCCA). A falta de sintomas específicos dificulta o diagnóstico precoce, limitando as opções de tratamento. Distúrbios metabólicos podem predispor ao câncer primário de fígado. Tendo em vista que as células cancerígenas são altamente dependentes da via glicolítica para atender às necessidades energéticas, avaliar marcadores moleculares envolvidos no metabolismo da glicose associados a CCA poderá contribuir no diagnóstico, assim como indicar alvos terapêuticos. Objetivos - Analisar expressão gênica e proteica do transportador de glicose-1 (GLUT1; gene: SLC2A1), e das enzimas hexoquinase II (HK2), fosfofrutoquinase-1 (PFK-1), lactato desidrogenase A (LDHA) e piruvatoquinase M2 (PKM2; gene:PKM) em pacientes com CCA e a correlação com perfil demográfico (sexo e idade), clínico (diabetes tipo II), bioquímico (dosagens de fosfatase alcalina, gama glutamil transferase, glicose e transaminases) e anatomopatológico (diferenciação celular, invasão vascular, perineural, linfática, presença de necrose, metástase) e hábitos de vida (tabagismo e elitismo). Casuística e Métodos - Serão estudados 60 indivíduos: 30 pacientes com CCA e 30 indivíduos sem sinais clínicos, bioquímicos e histopatológicos de CCA (grupo controle). Os dados clínicos, bioquímicos, anatomopatológicos e hábitos de vida serão obtidos em prontuário eletrônico. Será realizada extração de RNA das amostras (tecido parafinado) para análise de expressão gênica por PCR (reação em cadeia da polimerase) quantitativo (qPCR) em tempo real. A expressão proteica será analisada por imuno-histoquímica e quantificada pelo software ImageJ. Para análise estatística serão utilizados os testes qui-quadrado (¿2) ou Fisher, ANOVA com Post-Hoc, Wilcoxon e Mann Whitney. Será admitido erro alfa de 5%.