Participação da lipoxina A4 e das proteínas Rho GTPases no efeito anti-tumoral da crotoxina: estudos in vivo e in vitro

Resumo

A crotoxina, principal toxina do veneno de serpentes Crotalus durissus terrificus, exibe atividades antiinflamatória e anti-tumoral, inibindo funções de espraiamento e fagocitose por macrófagos, além de inibir drasticamente a fosforilação de tirosina-quinase e a expressão das proteínas GTPases RhoA e Rac, interferindo assim, com a eficiência do citoesqueleto na captação das partículas a serem fagocitadas. Ainda, a crotoxina inibe, in vivo e in vitro, o crescimento de células tumorais humanas e de murinos. Estudos recentes demonstraram que o aumento da ativação constitutiva das Rho GTPases, é crucial para a migração espontânea das células do carcinosarcoma de Walker 256, controlando a migração celular, sendo alvo importante na regulação da invasão do tumor e metástase. O objetivo geral deste trabalho é investigar a ação anti-tumoral da crotoxina sobre o tumor de Walker 256 (in vivo) e células LLC WRC256 (in vitro), enfocando a participação de: 1) proteínas do citoesqueleto e as proteínas intracelulares sinalizadoras, utilizando ensaios imuno-histoquímicos; b) participação dos mediadores gerados na via da lipoxigenase na ação anti-tumoral da crotoxina, em particular a participação da lipoxina A4, utilizando Boc2, antagonista de receptor de LXA4; c)a adesão e invasão tumoral, utilizando ensaios de adesão e competição com células LLC WRC256; d) proteínas sinalizadoras das GTPases Rho, Cdc42, Rac e as quinases FAK e PI3-quinase no efeito inibitório da crotoxina sobre o crescimento tumoral, analisando a expressão destas proteínas. (AU)