Avaliação das proteínas S-nitrosiladas do fungo Paracoccidioides brasiliensis após estresse nitrosativo e identificação de potenciais vias de sinalização redox

Resumo

Os fungos termo-dimórficos do gênero Paracoccidioides são os agentes causadores da paracoccidioidomicose (PCM), uma doença sistêmica prevalente na América Latina, que se estabelece através da inalação de conídios. Este fungo é considerado um patógeno intracelular facultativo capaz de sobreviver e replicar dentro de macrófagos não ativados. A sobrevivência do P. brasiliensis no hospedeiro, durante a infecção, depende da adaptação do fungo a diferentes condições, notoriamente ao estresse oxidativo/nitrosativo imposto por células do sistema imune, particularmente macrófagos alveolares. Atualmente, pouco se conhece sobre as vias de transdução de sinal deste fungo envolvidas na resposta aos mecanismos de defesa do hospedeiro. Certamente algumas destas vias são desencadeadas por espécies reativas de oxigênio e nitrogênio (ROS/RNS) geradas por células do hospedeiro. Levando-se em conta que o efeito do NO (óxido nítrico) sobre o patógeno é dependente das concentrações disponíveis, tais efeitos podem modular diferencialmente o status redox celular e consequentemente ativar distintas vias de sinalização. Esse evento é muito bem regulado e dinâmico e pode influenciar uma variedade de funções de proteínas. Entre as diversas reações oxidativas que podem ocorrer em cisteínas, destaca-se a S-nitrosilação, uma importante modificação pós-traducional dependente de NO que regula uma grande variedade de funções celulares e eventos de sinalização. Recentemente foi demonstrado por nosso grupo que células leveduriformes de Paracoccidioides proliferam quando expostas a baixas concentrações de NO. Dessa forma, este trabalho propõe avaliar o perfil de proteínas S-nitrosiladas em P. brasiliensis, bem como a detecção de sítios de S-nitrosilação, após o estímulo com diferentes concentrações de RNS e identificar potenciais vias de sinalização redox. A identificação de proteínas geradas em uma condição de estresse nitrosativo, pode ajudar na compreensão das propriedades antifúngicas das RNS e futuramente identificar potenciais alvos moleculares para o desenvolvimento de novas drogas. (AU)